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微小磁珠法分离胚胎大鼠神经干细胞的实验研究
作者:王彦惠        刘振华        廖可立        姜晓丹        李留洋        徐如祥        邹雨汐        戴宜武        杜谋选        蔡颖谦 
单位:王彦惠 刘振华(第一军医大学珠江医院神经内科 广东 广州 510282)廖可立 姜晓丹 徐如祥 邹雨汐 戴宜武 杜谋选 蔡颖谦(第一军医大学珠江医院神经外科 广东 广州 510282)李留洋(第一军医大学珠江医院肾移植科 广东 广州 510282) 
关键词:免疫磁珠      神经干细胞      神经巢蛋白 
分类号:R338.2
出版年,卷(期):页码:2002,9(4):0-0
摘要:
目的旨在以微小免疫磁珠(平均直径≤50 nm)分离提纯SD大鼠胚胎大脑皮层组织中的神经干细胞并进行培养,观察细胞的增殖分化情况并对其分化产物进行鉴定,评价该分离方法的可行性及其在神经干细胞研究中的应用价值. 方法取SD大鼠的胚胎大脑皮层组织制单细胞悬液,用微小磁珠分选出神经巢蛋白(nestin)阳性的细胞群,光镜下检测其纯度及活力后进行体外培养,特定条件下诱导分化并以免疫细胞方法检测产物的细胞类型. 结果分离的神经干细胞纯度为(89.2±4.8)%,细胞存活率(97.0±1.6)%,诱导分化产物中出现NSE阳性、GFAP阳性、巢蛋白(nestin)反应阳性细胞群落. 结论微小磁珠法分离提纯神经干细胞纯度高,获得细胞数多,并对细胞的生物活性无明显影响,提纯的细胞可用于后续实验.
基金项目:
军队科技攻关项目,广东省科技厅重点科技项目
作者简介:
参考文献:
Reynolds BA.Weiss S Generation of neurons and astrocytesform isolated cells of the adult mammalian central nervous system 1992(5022) Kemshead JT.Ugelstad J Magnetic separation techniques: their application to medicine 1985(01) Miltenyi S.Muller W.Weichel W High gradient magnetic cell separation with MACS 1990(03) Lendahl U.Zimmerman LB.Mckay RD CNS stem cell express a new class of intermediate filament protein 1990(23) Reynolds BA.Weiss S Clonal and population analysis demonstrate that an EGF-responsive mammalian embryonic CNS precusor is a stem cell 1996(03) 高国一.卢亦成.江基尧 免疫磁珠法分选胚胎大鼠脑神经干细胞的初步研究 [期刊论文] -第二军医大学学报2000(11) 马施华.曹雪涛.章卫平 一种利用微小磁珠建立的免疫磁珠细胞分离方法 [期刊论文] -第二军医大学学报1997(04) 马东初.初俊杰 采用免疫磁珠分离人骨髓巨核细胞 1992(10)
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