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噬菌体抗体库的构建及抗人脑胶质瘤单抗的筛选
作者:许志元        王爱东        黄强        兰青        周丽英        孙志方 
单位:苏州大学附属第二医院神经外科暨脑肿瘤研究室  
关键词:单克隆抗体      噬菌体抗体库      单链抗体      基因工程      胶质瘤 
分类号:R739.41
出版年,卷(期):页码:2001,8(4):0-0
摘要:
目的采用噬菌体展示技术制备抗人脑胶质瘤单抗. 方法以人脑胶质瘤细胞系SHG-44免疫小鼠,取其脾淋巴细胞,应用噬菌体展示技术构建噬菌体抗体库,并筛选抗人脑胶质瘤单抗. 结果筛选得到的小鼠全套免疫球蛋白的重、轻链可变区基因片段分别为340 bp和325 bp,建成的抗体库库容为5.7 ×106,60/96克隆具有与肿瘤细胞结合活性,阳性率为62.5%,与正常人淋巴细胞则全部呈阴性反应. 结论为胶质瘤单抗制备提供了一种新的方法.
基金项目:
国家自然科学基金
作者简介:
参考文献:
McCafferty J.Griffiths AD.Winter G Phage antibodies:filamentous phage displaying antibod y variable domains 1990 Kang AS.Barbas CF.Janda KD Linkage of recognition and replication functions by assembling combinatorial antibody Fab library along phage surfaces 1991 Orlandi R.Gussow DH.Jones PT Cloning immunoglobulin variable domai ns for expression by the polymerase chain reaction 1989 Hoogenboom HR.Griffiths AD.Johnson KS Multi-subunit proteins on th e surface of filamentous phage:methodologies for displaying antibody (Fab) heav y and light chains 1991(19) Sambrook J.Fritsch EF.Maniatis T Molec ular cloning: A laboratory manual. 2nd edition 1989 黄强 脑肿瘤分子外科学 1998
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